Spectroscopie par corrélation de fluorescence (SCF)
La spectroscopie de corrélation de fluorescence (FCS) est une analyse de corrélation de la fluctuation de l’intensité de fluorescence que nous utilisons pour mesurer la taille (0,5 à 200 nm) et le nombre de nanoparticules en solution. Dans FCS, les coefficients de diffusion sont déterminés pour les molécules fluorescentes et les particules passant par un volume optiquement défini, illuminé par un laser d’un microscope confocal à balayage laser. La technique fonctionne à la détection d’une seule molécule ou à proximité d’une seule molécule et fournit un nombre moyen de coefficient de diffusion, Dn, pour des particules isolément étiquetées ou un coefficient de diffusion moyen pondéral, Dw, pour des conditions dans lesquelles plusieurs étiquettes fluorescentes sont liées à chaque nanoparticule. Le FCS est un outil d’analyse très sensible car il observe un petit nombre de molécules (concentrations nanomolaires à picomolaires) dans un petit volume (~ 1 μm3) mais exige que les nanomatériaux soient marqués par fluorescence. Afin de contourner cette contrainte potentielle, nous avons développé un certain nombre de techniques d’étiquetage fluorescentes non perturbantes et à faible coût. La technique nécessite un microscope confocal à balayage laser (Leica, LSM SP5), qui peut également être utilisé pour des applications de microscopie fluorescente standard.
Ce contenu a été mis à jour le 12 mai 2022 à 16 h 35 min.